高压蒸汽灭菌器是利用饱和蒸汽的高温及压力进行灭菌的设备,具有灭菌效率高、效果可靠等优点,广泛应用于医疗、科研、食品等领域。以下从灭菌原理、适用范围、操作步骤、注意事项等方面详细介绍其灭菌方法的使用:
一、灭菌原理
通过在密闭容器内加热水产生高压饱和蒸汽(通常压力为0.105-0.140MPa,对应温度为121-126℃),利用蒸汽释放的潜热使微生物蛋白质变性、核酸破坏,从而达到灭菌目的。饱和蒸汽穿透力强,能有效杀灭细菌繁殖体、芽孢、真菌、病毒等微生物。
二、适用范围
医疗与生物实验:手术器械、玻璃器皿(如培养皿、试管)、培养基、敷料、橡胶制品(如手套)、生理盐水等。
食品与制药:食品原料、药品包装材料、实验用菌种培养基等需灭菌的物品。
其他领域:生物安全实验室废弃物、微生物检验样本容器等。
三、操作步骤(以常见立式/卧式高压蒸汽灭菌器为例)
1.准备阶段
检查设备:确认灭菌器压力表、安全阀、排气阀等部件正常,水位线在规定范围内(加水至水位标记处,避免过少干烧或过多影响蒸汽生成)。
物品准备:
待灭菌物品需清洗干净,玻璃器皿需干燥,避免残留水分影响灭菌效果。
用牛皮纸、棉布或专用灭菌袋包裹物品,松紧适度,便于蒸汽穿透;瓶装液体需松开瓶盖(非完全打开),防止爆瓶。
物品堆放需留有间隙,避免重叠,确保蒸汽流通(如将器械竖放、试管斜放)。
2.装载与密封
将物品放入灭菌室,注意不要超过灭菌器容积的2/3,避免堵塞排气口。
关闭舱门或盖子,确保密封良好(部分设备需旋紧螺栓或卡扣,检查密封圈是否老化)。
3.排气与升温
手动排气(部分设备):打开排气阀,加热至水沸腾,排出灭菌室内冷空气(约5-10分钟),直至排出的蒸汽呈连续柱状(冷空气未排尽会导致温度不足,影响灭菌效果)。
自动排气(现代设备):设备自动通过程序排出冷空气,无需手动操作。
关闭排气阀,继续加热,使压力和温度升至设定值(如0.105MPa、121℃)。
4.灭菌阶段
达到设定温度和压力后,开始计时,维持规定的灭菌时间(根据物品类型调整):
普通培养基、器械:121℃,20-30分钟;
含纱布、敷料的物品:121℃,30分钟;
耐高温的玻璃器皿、生理盐水:121℃,20分钟;
大容量液体(如500ml以上):需适当延长时间(121℃,30-40分钟),避免内部灭菌不彻底。
5.降压与冷却
自然降压冷却:灭菌结束后,关闭热源,让压力和温度自然下降(待压力表归零、温度降至80℃以下再开门,防止物品因内外压差过大导致爆沸或变形)。
快速降压(需谨慎):部分设备可通过缓慢打开排气阀降压,但需注意液体类物品禁止快速降压,以免沸腾喷溅。
6.出锅与检查
打开舱门,取出物品,检查包装是否干燥、完整(潮湿包装可能导致二次污染)。
对灭菌效果进行初步判断:如使用化学指示卡(灭菌后颜色变化)或生物指示剂(如嗜热脂肪芽孢杆菌孢子),确认灭菌合格后再使用。